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種子表型組學(xué):通過(guò)射線(xiàn)照相和多光譜圖像分析測定小麥種子中的侵染

更新時(shí)間:2022-04-14 點(diǎn)擊量:1431

射線(xiàn)照相和多光譜圖像分析有可能成為評估種子質(zhì)量和內部昆蟲(chóng)侵擾的有效、客觀(guān)的方法。本研究的目的是驗證射線(xiàn)照相和多光譜分析在檢測小麥種子中由Sitotroga grainella (Olivier) 及其不同發(fā)育階段引起的跡象和損害方面的效率。該實(shí)驗以*隨機設計進(jìn)行,50 粒種子重復6次。對樣品進(jìn)行實(shí)驗室誘導的侵染,并在5天和10天后進(jìn)行射線(xiàn)照相和多光譜分析。之后,將種子浸入水中24小時(shí),然后用切割刀片切片。量化具有卵或產(chǎn)卵跡象的種子、幼蟲(chóng)、蛹、成蟲(chóng)和昆蟲(chóng)畫(huà)廊的數量。使用廣義線(xiàn)性模型 (GLM) 方法并使用 Tukey 檢驗 (p<0.05) 來(lái)比較平均值。一般來(lái)說(shuō),射線(xiàn)照相(有或沒(méi)有對比)和多光譜方法是評估受蟲(chóng)害和未受蟲(chóng)害的小麥種子的可行工具。多光譜分析僅能有效識別種子表面的卵,而不能檢測種子內是否存在幼蟲(chóng)和蛹。

根據方法和樣本/評估期對總侵染的均值和方差進(jìn)行視覺(jué)分析,除多光譜方法外,在孵化后10天評估的樣本(樣本 2)中發(fā)現更大的變異性(圖 1 )。對于常規方法(種子切割)和具有對比度的X射線(xiàn),觀(guān)察到類(lèi)似的行為。比較兩個(gè)評估期(樣本 1 和樣本 2),樣本 2 中受蟲(chóng)害的種子百分比更高。

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圖1.與檢測受侵染種子和工作樣品的方法有關(guān)的小麥種子中谷物蛾侵染總百分比的平均表示、

關(guān)于受侵染種子的總比例作為每個(gè)評估期昆蟲(chóng)發(fā)育階段的函數(圖2),分析發(fā)現,與傳統方法和射線(xiàn)照相相關(guān)的多光譜方法的階段分類(lèi)不同,沒(méi)有對比。多光譜圖像分析僅顯示出由谷蛾引起的卵和穿孔跡象,其在第二評價(jià)期的侵染比例較高。 當使用其他方法時(shí),這些階段的觀(guān)察比例更大。分別觀(guān)察每種方法,發(fā)現傳統方法(切割)和對比X射線(xiàn)在兩個(gè)樣本中呈現出相似的侵擾比例,作為階段的函數。

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圖2.每個(gè)樣品中小麥種子侵染的總和,與常規方法(切割)和無(wú)損方法(X 射線(xiàn)和多光譜)檢測到的谷蛾發(fā)育階段有關(guān)

使用傳統的切割方法、帶和不帶對比的X射線(xiàn)以及多光譜圖像來(lái)檢查受侵染的種子,可以驗證這些技術(shù)在識別由麥芽孢桿菌引起的卵、幼蟲(chóng)、蛹和小麥種子損傷方面的效率。圖3)。結果表明,使用405nm波段(藍色可見(jiàn)光)可以檢測小麥中的麥片沙門(mén)氏菌侵染。可見(jiàn)條帶對識別害蟲(chóng)的存在和損害的敏感性更高,這可能是由于小麥種子的顏色和質(zhì)地發(fā)生了變化,這通常是由 S. grainella 攝食引起的

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圖3.小麥種子傳統切割、有和沒(méi)有對比的 X 射線(xiàn),以及多光譜圖像。種子上的黃色和橙色是未受蟲(chóng)害的區域,而淺至深藍色代表蟲(chóng)害或蟲(chóng)害

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